Государственная фармакопея Республики Беларусь -
Скачать (прямая ссылка):
# Двухслойный агаровый метод. 1 мл подготовленного продукта вносят в две пробирки с 4 мл расплавленной и охлажденной до 450С среды №1 (для определения количества бактерий). Содержимое пробирки быстро перемешивают, переносят в чашку Петри, содержащую 15-20 мл застывшей питательной среды №1, и равномерно распределяют по поверхности. Для количественного определения грибов поступают аналогичным способом, используя среду №2. Инкубирование посевов, подсчет колоний бактерий и грибов выполняют, как описано выше.
МЕТОД НАИБОЛЕЕ ВЕРОЯТНОГО ЧИСЛА
Метод наиболее вероятного числа (НВЧ) уступает по точности методам мембранной фильтрации и чашечного подсчета. Особенно недостоверными являются результаты подсчета плесневых грибов. Поэтому метод НВЧ следует применять лишь для подсчета бактерий в тех случаях, когда другие методы недоступны. Если применение данного метода обосновано, определение проводят в соответствии с нижеследующими указаниями.
Готовят ряд не менее, чем из трех последовательных десятикратных разведений продукта, в соответствии с указаниями раздела «Подготовка образца». Для каждого уровня разведения используют три аликвоты по 1 г или 1 мл для ино-
куляции трех пробирок, содержащих от 9 до 10 мл подходящей жидкой питательной среды (например, питательной среды А). При необходимости, к среде могут быть добавлены поверхностно-активные агенты (например, полисорбат 80) или инактиваторы антимикробных компонентов. Таким образом, для трех уровней разведения готовят для инокуляции девять пробирок. Все пробирки инкубируют при температуре от 300С до 350С в течение 5 дней. Для каждого уровня разведения записывают количество пробирок, в которых наблюдается микробный рост. Если природа испытуемого продукта приводит к получению неопределенных или трудно оцениваемых результатов, производят пересев на ту же жидкую среду или на подходящую агаризованную среду (например, агаризованную среду В), инкубируют при той же температуре от 18 до 24 часов и для подсчета используют полученные результаты. Наиболее вероятное количество микроорганизмов в грамме или миллилитре испытуемого продукта определяют по Таблице 2.6.12.-1.
Таблица 2.6.12.-1
Наиболее вероятное число микроорганизмов
Три пробирки для каждого уровня разведения
Количество пробирок с на НВЧ Категория* Пределы 95% до
блюдаемым ростом микроор- в 1 г верительного ин-
ганизмов тервала
0,1 г 0,01 г 0,001 г 1 2
0 0 0 < 3 - -
0 1 0 3 X < 1 17
1 0 0 3 X 1 21
1 0 1 7 X 2 27
1 1 0 7 X 2 28
1 2 0 11 X 4 35
2 0 0 9 X 2 38
2 0 1 14 X 5 48
2 1 0 15 X 5 50
2 1 1 20 X 8 61
2 2 0 21 X 8 63
3 0 0 23 X 7 129
3 0 1 38 X 10 180
3 1 0 43 X 20 210
3 1 1 75 X 20 280
3 2 0 93 X 30 390
3 2 1 150 X 50 510
3 2 2 210 X 80 640
3 3 0 240 X 100 1400
3 3 1 460 X 200 2400
3 3 2 1100 X 300 4800
3 3 3 > 1100 - -
* Категория 1: Нормальные результаты, получаемые в 95% случаев.
Категория 2: Менее вероятные результаты, получаемые только в 4% случаев.
Их не следует использовать при принятии важных решений. Результаты, еще ме-
нее вероятные, чем относящиеся к категории 2, не приводятся и всегда являются
неприемлемыми.
РОСТОВЫЕ СВОЙСТВА ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД И ПРОВЕРКА ПРИГОДНОСТИ МЕТОДИКИ ИСПЫТАНИЯ
